Sadržaj:

Kako pronalazite koncentraciju DNK iz apsorbancije?
Kako pronalazite koncentraciju DNK iz apsorbancije?

Video: Kako pronalazite koncentraciju DNK iz apsorbancije?

Video: Kako pronalazite koncentraciju DNK iz apsorbancije?
Video: ДНК и РНК 2024, Studeni
Anonim

Koncentracija DNK procjenjuje se mjerenjem apsorbancija na 260 nm, podešavanjem A260 mjerenje zamućenja (mjereno prema apsorbancija na 320 nm), množenjem faktorom razrjeđenja i korištenjem odnosa A260 od 1,0 = 50 ug/ml čiste dsDNA.

Isto tako, ljudi pitaju, kako pronalazite koncentraciju DNK?

Da biste odredili koncentraciju DNK u izvornom uzorku, izvršite sljedeći izračun:

  1. Koncentracija dsDNA = 50 μg/mL × OD260 × faktor razrjeđenja.
  2. Koncentracija dsDNA = 50 μg/mL × 0,65 × 50.
  3. Koncentracija dsDNA = 1,63 mg/mL.

Također, što je dobra koncentracija DNK? A dobro kvaliteta DNK uzorak treba imati A260/A280 omjer 1,7-2,0 i A260/A230 omjer veći od 1,5, ali budući da se osjetljivost različitih tehnika na te kontaminante razlikuje, te vrijednosti treba uzeti samo kao vodič za čistoću vašeg uzorka.

Na ovaj način, apsorbira li DNK na 280 nm?

Omjer apsorpcije na 260 nm vs 280 nm je obično se koristi za procjenu DNK kontaminacija proteinskih otopina, budući da proteini (posebno aromatske aminokiseline) upiti svjetlo na 280 nm.

Kako koristite NanoDrop za koncentraciju DNK?

U osnovi nanokapljica daje vam mogućnost odabira DNK , RNA, proteini. Trebate odabrati DNK , zatim stavite 2 ΜL vode (mili Q preferirano) odaberite "Prazno" nakon toga stavite još 2 ΜL vode kako biste potvrdili da je mjera 0. Zatim stavite 2 ΜL svog uzorka. Dobit ćete mjerenje.

Preporučeni: