Zašto se nitrocelulozna membrana koristi u Southern blottingu?
Zašto se nitrocelulozna membrana koristi u Southern blottingu?

Video: Zašto se nitrocelulozna membrana koristi u Southern blottingu?

Video: Zašto se nitrocelulozna membrana koristi u Southern blottingu?
Video: Hidrofor provera pritiska u burencetu 2024, Studeni
Anonim

U originalnom protokolu nitrocelulozna membrana bio je korišteni za upijajući u slučaju Southern blot ali u novije vrijeme najlon membrane implementirani su za upijajući proces zbog njihove sposobnosti da učinkovito vežu veću količinu DNK što omogućuje Southern blot provesti s manjom količinom

Sukladno tome, zašto se nitrocelulozna membrana koristi u upijanju?

Nitrocelulozne membrane su popularna matrica korišteni u proteinima upijajući zbog njihovog visokog afiniteta za vezanje proteina, kompatibilnosti s različitim metodama detekcije (kemiluminiscencija, kromogena i fluorescencija) i sposobnosti imobilizacije proteina, glikoproteina ili nukleinskih kiselina.

Također, zašto se DNK prenosi na najlonsku membranu? Korištenjem 0,4 M NaOH kao prijenos otapalo nakon kratke prethodne obrade gela u kiselini, DNK se depurinira tijekom prijenos . Izlaganje DNK na ultraljubičasto svjetlo, bilo u gelu ili slijedećem prijenos do najlonska membrana , smanjuje njegovu sposobnost hibridizacije.

Dodatno, koja je svrha Southern blottinga?

A Southern blot je metoda koja se koristi u molekularnoj biologiji za detekciju specifične sekvence DNK u uzorcima DNA. Southern blotting kombinira prijenos fragmenata DNA odvojenih elektroforezom na membranu filtera i naknadno otkrivanje fragmenata hibridizacijom sonde.

Kako Southern blotting pomaže u forenzičkim studijama?

A Southern blot , nazvan po svom izumitelju Edwinu južnjački , je metoda koja se koristi za provjeru prisutnosti specifične sekvence DNK u uzorku DNK. Nakon što se DNK pojedinca probavi specifičnim restrikcijskim enzimom, rezultirajući fragmenti se analiziraju pomoću Southern blot analiza.

Preporučeni: