Zašto se spektrofotometar mora postaviti na određenu valnu duljinu?
Zašto se spektrofotometar mora postaviti na određenu valnu duljinu?

Video: Zašto se spektrofotometar mora postaviti na određenu valnu duljinu?

Video: Zašto se spektrofotometar mora postaviti na određenu valnu duljinu?
Video: Я упаковал 50 СОВЕТОВ ПО БЛЕНДЕРУ в одно видео! 2024, Studeni
Anonim

Kada prilagodite valna duljina na a spektrofotometar , ti su mijenjanje položaja prizme ili difrakcijske rešetke tako da različit valne duljine svjetlosti su usmjerena na prorez. Što je širina proreza manja, to je bolja sposobnost instrumenta da razluči različite spojeve.

Stoga, na koju će valnu duljinu biti podešen spektrofotometar?

Ovisno o rasponu valne duljine izvora svjetlosti, može se klasificirati u dvije različite vrste: UV-vidljivi spektrofotometar: koristi svjetlost u ultraljubičastom rasponu (185 - 400 nm) i vidljivom rasponu (400 - 700 nm ) spektra elektromagnetskog zračenja.

Isto tako, zašto trebate kalibrirati spektrometar svaki put kada promijenite valnu duljinu? Spektrofotometar treba biti kalibriran protiv slijepe otopine tako da mjerenja nakon što može koristiti apsorbanciju slijepe otopine kao nultu referencu. Mjera sposobnosti tvari da apsorbira svjetlost određene valna duljina.

na kojoj valnoj duljini treba uzeti očitanja?

Uzeti čitanja u intervalima od 5 nm malo prije i poslije ovoga valna duljina . Na primjer, ako je maksimalna apsorpcija pronađena na 450 nm, onda da biste dobili točniju čitanje od λmax, uzeti apsorbanciju čitanja na 440, 445, 455 i 460 nm.

Zašto mjerite apsorbanciju otopine na 550 nm?

Proteini reagiraju s ionima bakra u alkalnim riješenje za stvaranje kompleksa ljubičaste boje koji apsorbira svjetlost na 550 nm . Stoga, po mjerenje koncentracija kompleksa pomoću A550 ( Upijanje na 550 nm ), vas su također mjerenje koncentracija proteina.

Preporučeni: